هدف : تعیین درصد لکوسیت ها در سلول
اهمیت این آزمایش
۱. افزایش درصد ائوزینوفیل ها درخون می تواند دلیلی برابتلا فرد به بیماریهای کرمی یا بیماریهای حساسیتی و… باشد.
۲. افزایش در صد نوتروفیلهای خون را نوتروفیلی گویند ودر بیماریهائی همچون آپاندیسیت حاد، پنومونی (سینه پهلو)، مننژیت چرکی، سپتیسمی میکروبی، دیفتری، تب های روماتیسمی… نوتروفیلی دیده می شود.
۳. افزایش در صد مونوسیت های خون را مونوسیتوز نامیده می شود و در بیماریهای توبرکولوزیس ( بیماری سل)، بروسلوز (بیماری تب مالت)، سیفلیس، تیفوس،مالاریا، عفونتهای قارچی و غیره دیده میشود.
۴. افزایش در صد لنفوسیت های خون لنفوسیتوز نامیده می شود و در بیماریهائی همچون سیاه سرفه، سرخک، اوریون، آبله مرغان، هپاتیت، سل، سیفلیس، حصبه، تب مالت… دیده میشود.
شمارش افتراقی گلبول های سفید خون در یک شخص بالغ نرمال به قرار ذیل است:
نوتروفیل ۶۰
لنفوسیت ۳۲
مونوسیت ۵
ائو زینوفیل ۳
بازوفیل ۰
جمع ۱۰۰
درخون یک شخص نرمال ممکن است ۵ نوع گلبول سفید یافت شود. منوسیت ها, بازوفیل ها وائوزینوفیل ها کمترین درصد گلبول سفید خون را تشکیل میدهند. نوتروفیل ها ,لنفوسیت ها که بیشترین درصد گلبول سفید خون را دارا هستند.
منوسیت ها:
مونوسیتها بزرگترین سلول تک هسته ای در جریان خون است.مونوسیتها در عمل فاگوسیتوز نقش مهمی دارند.اندازه مونوسیت هابسیارمتفاوت است.قطر آنها ازده تا سی میکرون متغیراست .هسته مونوسیتها نعل اسبی (horse shoe ) یا به شکل کلیه (KIDNEY) و لوبیایی می باشد ,هستک در داخل هسته دیده نمی شود .کروماتین هسته مونوسیتها ظریف تور مانند مشبک (LACY) واسفنجی شکل است سیتوپلاسم آنها زیاد و آبی خاکستری تار که حاوی دانه های ریز فلفلی به نام دانه های Azurophilicخوانده میشوند.سیتوپلاسم دارای پاهای کاذب می باشد.مونوسیتها ممکن است حاوی واکوئل باشند .حدود نرمال مونوسیتها در خون محیطی دو تا هشت در صد گلبولهای سفید خون را تشکیل میدهد .
نوتروفیل:
نوتروفیل یک هسته چند لوبه دارد. بطوریکه لوب ها توسط یک رشته کروماتین بهم وصل می شوند هسته این سلول ها مثل حرف E انگلیسی است.
لنفوسیت:
اندازه اش کمی بزرگتراز گلبول های قرمزاست. یک هسته بزرگ ویک پارچه دارد.مثل اینکه تمام سلول را هسته پرکرده و سیتوپلاسم سلول خیلی کمه
بازوفیل ها:
یک هسته کم رنگ چند قسمتی دارند . ویژگی مهم این سلول وجود دانه های نسبتا زیاد سیاه رنگ در داخل سیتوپلاسم سلول که این دانه هاحتی روی هسته سلول را پوشانده است. بطوریکه هسته سلول به سختی دیده می شود. دانه های داخل سیتوپلاسم بازوفیل ها حاوی ماده هیستامین هستند. که نقش مهمی در واکنشهای آ لرژیک دارند.
ائوزینوفیل ها:
این سلول یک هسته دو قسمتی دارند.مشخصه این سلول وجود دانه های فراوان نارنجی درشت است. که دانه ها روی هسته را نمی پوشانند ائوزینوفیل ها دربعضی از بیماری انگلی (بیماری کرمی) وبیماری های حساسیتی در خون افزایش می یابد. تعداد طبیعی ائوزینوفیل ها در خون (۵-١)درصد گلبولهای سفید خون را تشکیل میدهد.
نحوه شمارش گلبولها:
وسایل مورد نیاز:
پنبه، الکل، لانست، محلول رنگی تورک، ملانژور، لام نئوبار یا توما
روش کار:
شروع عمل شمارش باید بعد از قسمت نازک و پر مانند سر گسترش خونی آغاز شود. حرکت لام در زیر عدسی شیئX100 میکروسکوپ مهم است, که به ترتیب به شکل رفت وبرگشتی در عرض لام یا حرکت پلکانی, یا حرکت لام به شکل زیگزاکی زیر عدسی شیئ میکروسکوپ انجام می شود. در هر میدان دید تعداد و نوع لگوسیتها را در جدول ۱۰در ۱۰ مشخص می کنیم
میدان دید اول:
نتیجه میدان نخست
تفکیک گلبول های سفید در میدان اول
نوتروفیل ۲
لنفوسیت ۱
مونوسیت ۲
ائو زینوفیل ۰
بازوفیل ۰
جمع ۵
میدان دید دوم:
در این میدان دو عدد نوتروفیل داریم البته در پائین سمت چپ و یک عدد لنفوسیت در بالای میدان.
نتیجه میدان دوم
تفکیک گلبول های سفید در میدان دوم
نوتروفیل ۲
لنفوسیت ۱
مونوسیت ۰
ائو زینوفیل ۰
بازوفیل ۰
جمع ۳
میدان دید سوم:
نتیجه میدان سوم
تفکیک گلبول های سفید در میدان سوم
نوتروفیل ۱
لنفوسیت ۱
مونوسیت ۰
ائو زینوفیل ۱
بازوفیل ۰
جمع ۳
تفکیک گلبول های سفید در میدان چهارم
نوتروفیل ۰
لنفوسیت ۰
مونوسیت ۰
ائو زینوفیل ۲
بازوفیل ۰
جمع ۲
به همین ترتیب میدانهای دید را بررسی میکنیم تا یکصد عدد گلبول سفید را مورد شناسائی و تفکیک قرار دهیم که مجموع نتایج در جدول زیر مشاهده می شود:
در صد تفکیک گلبول های سفید
نوتروفیل ۵۶
لنفوسیت ۳۱
مونوسیت ۴
ائو زینوفیل ۹
بازوفیل ۰